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求助:如何体外分离培养羊骨髓来源间充质干细胞?

 发布者:JiaHCXSB  发布时间:2010年2月2日 来源:CRTER杂志

答复:山羊用体积分数为10%水合氯醛3mL和安定2mL肌肉注射麻醉,固定四肢,术区剃毛,常规消毒铺巾。于髂后上棘处行骨髓腔穿刺,抽取骨髓5mL,与等量DMEM/F12培养液充分混匀(其中含肝素1000u/mL抗凝)。将混合液1000r/min离心5min,弃含油脂的上清,加入含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基15mL吹匀成单细胞悬液,接种到50mL培养瓶,置37、体积分数为5%的CO2饱和湿度孵箱内孵育,3d后半量换液,以后三四天换液1次,倒置显微镜下观察细胞形态变化。

 

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