求助：人胎盘间充质干细胞的分离培养及扩增步骤！
发布者：JiaHCXSB 发布时间：2010年2月2日 来源：ＣＲＴＥＲ杂志 |
答复：采用酶消化法进行人胎盘间充质干细胞的分离培养。无菌条件下取足月剖宫产胎儿的胎盘，剥除羊膜，剪取胎儿侧胎盘组织，PBS反复冲洗，剪成碎片。加入1g/L胶原酶Ⅱ 37℃消化45min，过100目筛网，收集细胞悬液，1000 r/min离心5 min，弃上清。用PBS重悬细胞，加入质量分数为6%的羟乙基淀粉（体积比为4:1）充分混匀，室温静置45min，1000 r/min离心5min，PBS洗涤2次。按1×109 L-1密度接种于培养瓶中，置于37℃、体积分数为5%的CO2饱和湿度环境下，用含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12进行培养。7 d后首次全量换液，弃去未贴壁细胞，每三四天换液1次。
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